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16141-079 GIBCO胚胎干细胞用胎牛血清FBS

采购热度:312 发布时间:2019/4/28 13:07:05

型号:

价格:电议 产地:中国大陆

简单介绍:16141-079 GIBCO胚胎干细胞用胎牛血清FBS Gibco胎牛血清适用于各种癌细胞株,娇贵细胞,原代细胞,干细胞(胚胎干细胞,间充质干细胞等)培养,可以用于体外诊断。

详细介绍

产品资料
产品名称
:Gibco胚胎干细胞用胎牛血清

英文名称:Gibco FBS,embryonic stem cell-qualified, US origin.

产品货号:16141079,16141-079

血清等:Specialty(用)

处理方式:标准,三次0. 1 um滤膜过滤

纯度等:Standard

地区来源:新西兰

物种来源:胎牛

内毒素水平:<=50 EU/ml (levels routinely <= 10 EU/ml)

血红素水平:<=25 mg/dl

热灭活:未灭活

病毒和支原体:阴性

产品规格:500 ML

保存条件:-5 to -20°C

运输方式:干冰运输

适用范围:Gibco胎牛血清适用于各种癌细胞株,娇贵细胞,原代细胞,干细胞(胚胎干细胞,间充质干细胞等)培养,可以用于体外诊断。

Gibco胎牛血清使用中遇到的常见常见问题

、血清灭活问题。

1、问:加到培养基中的血清必须灭活吗?

答:不是必须的,看做什么实验了。

2、问:Gibco胎牛血清灭活是56℃ 30分钟吗?

答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。 但是如果用于培养些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,般是56℃,30min。

3、问:我要做滋养细胞培养,胎牛血清要灭活吗?

答:进口的般都已灭活,国产的不定,zui好还是灭活下再用较安全。

4、问:我用病毒上清转染细胞,培养用的血清需要灭活吗?因为血清中可能有些补体和抗体,是不是会影 响转染?我想未灭活的血清中含些抗体补体可能会和病毒相结合,影响转染,正确吗?细胞是单核细胞白血病细胞, 病毒是病毒包装细胞PT67收集的病毒上清。为什么要用无血清培养基加病毒孵育几小时,目的是什么?

答:血清定要灭活,可以先用无血清培养基加病毒孵育几小时以后再加血清。避免杂蛋白对病毒和宿主 结合过程的干扰,般是2-6小时,根据细胞的状态决定。血清不定需要灭活,灭活的目的是将血清中的补体灭活 !这要根据实际情况而定,如果没有把握那就灭活吧,也不麻烦56度半个小时。

5、问:(1)我买的是Gibco北美胎牛血清,要灭活吗?有些说法是需要,有些说直接解冻后就可以加入到培 养基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有关系吗?

答:关于血清的热灭活,是很多人感兴趣也存在定争议的话题。大多数实验室将血清的热灭活还是作为 常规来执行,因为有两个作用,是灭活补体,二是灭活血清中可能存在的支原体。但是实验者并没有考虑热处 理对血清中的生长因子、氨基酸等成分带来的负面影响。

我在实验室处理血清的时候,有次水浴箱在灭活过程中出现故障,温度升高到80℃,血清变成了凝胶状 ,我重新处理了另外份血清,将两份血清对比,发现高温直接影响到血清所含的抗体蛋白。在56℃下灭活半小时以 上,肯定也会对里面的蛋白起到破坏作用。下次有机会我做个延长灭活时间的实验试试,看看到底有多大的影响。热 灭活之后,血清放在四度冰箱久了,就会有沉淀产生,这常常会被认为是微生物污染或者是黑胶虫污染。为了验证到 底有没有污染,常常又会把血清放置37℃温育,但是血清中的蛋白会进步析出,zui后还是要做镜检,无菌培养试验 ,和革兰氏染色试验,非常麻烦。

我看过份资料,里面提到70%的实验者认为灭活是理所当然的。常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间, 而时间则从15分钟到60分钟不等。其中zui常用的手法是56℃热处理30分钟。随着血清采集、处理、加工工艺的提高 ,许多早先认为是热灭活的原因已经不再成立,只有少数对血清进行热灭活的研究者在实验中证实了这步骤的有效 性和必要性。有人比较过11个不同细胞株,发现其中热灭活对6 个细胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纤维细胞,MRC-5) 的生长带来负面影响,三个细胞株(FOX-NY,MDCK和CHO-K1)不受热灭活的影响,而只有两个细胞株(Balb/3T3, Sp2/0Ag14 hybrid),在热灭活之后,细胞生长有轻微的改善。所以,在正常的操作下,热灭活通常对细胞的生长没 有明显的促进作用。

你可以摸索下,血清从-20℃冰箱拿出来之后在常温解冻,然后混匀分装成两份,份灭活,份不灭活 ,比较这两种血清对细胞是否有影响。然后再确定是灭活还是不灭活。这个过程zui多也就个星期。同时你还要考虑 血清灭活与否对你后续的实验有没有影响。

问:(2)分装后的血清从-20℃取出放4℃让其液化,却见血清比较混浊,有沉淀产生,这属正常吗?

答:正常。

公司介绍

上海创凌生物可为您提供高品质的原装GIBCO血清。Gibco 胎牛血清可满足您的研究需求及预算控制需要,为您大限度挖掘基础细胞培养、业研究和特殊试验的价值。

更新时间:2022/5/6 0:09:38

标签:GIBCO胚胎干细胞用胎牛血清FBS   

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