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点击次数：6212 发布时间：2022/5/7 11:30:30
一．RAW264.7细胞
细胞取材于Abelson小鼠白血病病毒诱发的肿瘤组织，是科研上尤为常用的炎症细胞模型。该细胞易于增殖，有DNA转染力，对RNA干扰敏感，常用作转染宿主细胞和复制小鼠诺如病毒。细胞有sIg-、Ia-、Thy-1.2抗原阴性。据报道，该细胞建系后已不分泌且检测不到病毒颗粒，XC斑点形成实验阴性。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞，LPS或PPD处理2天后可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。
二、产品说明
1、产品名称
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包装规格
货号：AD600150
规格：1.5ml
3、储存条件
常温运输，4℃保存，可保存两年，拒绝反复冻融。
三、产品应用
各种细胞类型中的转染效率。
可用于多种真核细胞系的DNA转染、siRNA转染和共转染；
可用于各种原代细胞的DNA转染、siRNA转染；
可转染度难转染的免疫细胞、悬浮细胞，如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等；
转染siRNA到任何哺乳动物细胞。
四、使用说明
1、材料准备
RNA 浓度 20 uM /L
质粒 DNA 浓度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素 ）
2、操作步骤
提 1 天接种细胞：细胞汇合度在 60-80%左右，再进行转染。
核酸复合物制备：将核酸与转染试剂按照 1:1 关系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混匀，室温静 止 10-15 分钟。
在细胞培养基中加入核酸复合物：根据参考用量在细胞中加入核酸复合物，并轻轻混匀；细胞培养基 里面可以含有血清。
细胞换液：转染 24 小时后对细胞进行正常换液，悬浮细胞转染过程中不用换液。
分析结果：质粒 DNA 转染 48-72 小时后荧光检测转染效率，48-96 小时检测 mRNA 或蛋白表达。若 进行稳定表达细胞株的筛选，则在转染后 24-48 小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA 转染后 9 小时荧光检测转染效率，48-72 小时检测 mRNA 或蛋白表达。
原创作者：上海创凌生物科技有限公司
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