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点击次数：6873 发布时间：2021/11/16 10:40:22
表格一：实验仪器
| 仪器 |
| 透射电子显微镜 |
| 超薄切片机 |
表格二：试剂
| 试剂 |
| PBS（pH7.4） |
| 无水乙醇 |
| 丙酮 |
| 1% |
| Pon812包埋套装 |
| 醋酸双氧铀 |
| 醋酸铅 |
二、 实验步骤
1. 醛类固定：加入1mL 2.5%戊二醛溶液（PBS 稀释），4度固定过夜；
2．清洗：用PBS清洗4次，每次静置15min；
3．固定：用1%溶液 4度固定2h；
4．清洗：用PBS清洗4次，每次静置15 min；
5．脱水：用50%、70%、80%、90%乙醇梯度脱水各静置15min(在70%乙醇中静置过夜)，再用100%乙醇脱水2次，每次静置20min；
6．置换：用丙酮置换2次，每次静置15min；
7. 浸渍：过程如下：
A．丙酮：包埋剂=2：1（体积比）的浸渍液中浸渍1h；
B．丙酮：包埋剂=1：2（体积比）的浸渍液中浸渍4h；
C．纯包埋剂浸渍2次, 每次24h；
8． 包埋：将样品放入盛有纯包埋剂的包埋板中；
10．聚合：将包埋板置于65℃条件下各聚合48h以上；
11．修块：将包埋头修成梯形，且样品表面积小于0.2mm×0.2mm；
12．超薄切片：切片厚度70nm；
13．染色：醋酸双氧铀染色 10min后清洗；
醋酸铅染色 10min后清洗；
14. 上机检测。
原创作者：上海创凌生物科技有限公司
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