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技术文章

NuSmart®核酸直接释放技术和标准核酸提取技术差别

点击次数:3810   发布时间:2024/3/20 10:48:50

NuSmart®核酸直接释放技术和标准核酸提取技术差别

基因组DNA提取作为分子生物学常规技术是每个实验室研究人员熟悉的技术。而想获得基因组DNA只需要将核酸外的结构破坏就能够将核酸释放出来。常见有以下几种方法,包括机械力裂解、酶裂解以及化学裂解。这几种方法的区别见下表:

方法

机械力裂解

酶裂解

化学裂解

原理

外力破坏细胞壁和/或细胞膜

消化蛋白质结构以及破坏组蛋白的缠绕

缓冲液体系中加入去垢剂破坏脂膜并释放内部成分

优势

操作简单、快速

无需机械力

操作简单

无需其他设备

劣势

多样本时比较耗时

处理过长中产热导致基因组降解

基因组容易断裂

需要研磨设备

价格昂贵

耗时

 

释放的抑制物对下游扩增有影响

不适合某些细胞器基因组的获得

 

落实在产品上,实验室标准核酸提取纯化包括有机提取、硅胶柱离心提取、磁珠吸附提取。这几种方法对比如下表:

方法

有机提取

硅胶柱提取

磁珠提取

原理

苯酚-lvfang抽提和离心进行分离和纯化

通过机械力和/或酶裂解释放核酸,硅胶柱与其形成静电吸附,通过离心和盐粒子洗涤进行分离纯化

通过机械力和/或酶裂解释放核酸,带电磁珠与其吸附,在磁场作用下进行分离纯化

样品

细胞、组织、植物等

所有样品类型

所有样品类型

纯度

通量

低通量

中通量

高通量

优势

充分裂解

价格便宜

特别适合难处理样本

操作方便

产量和纯度都高

可处理多种样本

产量高

不会堵塞

可设备自动化操作

劣势

使用有毒有害化学试剂

不易购买

容易堵塞

产量有上限

不利于微量样本操作

耗时

30-60分钟

30-60分钟

30分钟

通过对比发现以上方法操作复杂、费时费力且危险,为了解决这一问题,我们推荐NuSmart®核酸直接释放技术。该方法只需要5分钟,不同温度环境下,无需重复训练即可完成核酸直接释放。结合下游开发试剂盒,能够满足常规分子生物学实验室的需求。

方法

NuSmart®核酸直接释放技术

标准/传统核酸提取法

原理

通过利试剂破坏细胞壁/膜和细胞核膜,可以释放基因组DNA。特殊纳米材料提高PCR灵敏度

通过机械力和/或酶裂解细胞释放核酸,硅胶柱等材料与其吸附,通过离心/磁场作用进行提取纯化

样品

任何样本类型

任何样本类型

样品量

细胞:1-103

组织:1-2mm

植物叶片:1-4mm

微生物培养液:10uL

细胞:>106

组织:>10mg

植物叶片:>100mg

微生物培养液:0.5-1mL

耗时

5分钟

30-60分钟

通量

高通量

硅胶柱法:中通量

磁珠法:高通量

优势

对于小量和微量样本十分友好

操作简单,无需训练

基因组完整性好

无酶、无有机试剂

无大型设备投入

 

操作方便

产量高

纯度高

劣势

 

基因组容易断裂

操作步骤多、费时

需要设备

 

 

 

 

 

原创作者:上海创凌生物科技有限公司

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