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点击次数：5097 发布时间：2018/7/23 16:07:30
GelRed 和GelGreen是设计以取代剧毒的代替高毒性的溴化乙锭（EtBr）的新一代核酸凝胶荧光染料。Biotium科学家研发的GelRed 和GelGreen集低毒性、高灵敏性和出色的稳定性等优点于一体，效果由于EtBr及其他EtBr替代品。
几十年来，EtBr因极其低廉的价格，一般的灵敏度，一直被用作核酸凝胶染色的主要染料。然而EtBr是一个高度诱变的物质。该染料的使用安全隐患，净化及废物处置的相关费用等，*终导致其代价高昂。正因如此，近年来市场上出现了一些替代品，如SYBR系列染料等。尽管这些替代染料减少了致突变性，但却丧失了染料其他方面的功能。例如，SYBR Safe的灵敏度很低，SYBR Green及SYBR Gold的稳定性远远低于EtBr。SYBR染料能快速的进入细胞，结合线粒体及细胞核DNA，是的染料在一定浓度是有毒的。事实上，在紫外线或其他诱变剂诱导下，SYBR Green I 强烈的突变性已经被广泛认知。（Ohta，et al.Mut Res 492,91(2001)）
为了保证GelRed和GelGreen的安全性，Biotium的科学家采用一种新型非常简单的概念：阻止染料进入活细胞减少遗传毒性。我们相信，不给DNA结合染料渗透活细胞中结合基因组DNA的机会，便可以保证染料没有或大幅度减少其诱变性作用。因此，我们设计的GelRed和GelGreen 染料拥有独特化学结构保证其无法渗透细胞膜。Ames试验验证即使浓度远远高于实验者操作凝胶染色的工作浓度，GelRed和GelGreen也无诱变性。此外，环境的安全性试验表示，GelRed和GelGreen是完全无害的，对水生生物无毒。因此，废弃的GelRed和GelGreen可以直接倒入下水道，或按照普通垃圾处理。
无论是作为预制凝胶染料染色或电泳后染色，GelRed和GelGreen染料都是搞灵敏度的。312/302nm的紫外光透射下，GelRed灵敏度远远超过EtBr，与SYBR Gold灵敏度相当，后凝胶染色法GelRed效果更明亮。与SYBR Gold不同的是，GelRed 也可以被作高度灵敏的与之惊叫预制凝胶染色。GelGreen是用于488nm激光凝胶扫描仪或者可见蓝光激发的Dark Reader 的研究人员使用要求。GelGreen光谱类似于SYBR Safe，但比后者更为灵敏。
GelRed和GelGreen另一个主要优势是其显著的稳定性。可以用操作EtBr同样的方式操作两种染料。这意味着，染料在水中是非常稳定的，可以在室温下长期储存，也可以在微波中加热进行预制凝胶。这两种燃料也非常耐光，暴露在室内灯光下也比较稳定。
EB GelRed SYBR Safe GelGreen
图1. GelRed 和GelGreen比EB和SYBR Safe更灵敏。左图：比较了GelRed 和EB 的1%预制胶，TBE缓冲液跑胶。右图：比较了GelGreen和SYBR Safe 1%琼脂糖凝胶的后染状况，同样在TBE缓冲液中完成。选用了Invitrogen的1 Kb的DNA Ladder作2倍稀释，分别加入四个泳道中，从左向右依次为200ng，100ng，50ng和25ng。
图2. 在37°C下，分别使用1X SYBR Green I, SYBR Safe, GelRed ａnd GelGreen 对HeLa 细胞进行孵化，并分别在5分钟（A)和30分钟（B）后观察。实验显示SYBR染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色（以上仅图示 SYBR Green 1），而 GelRed 和 GelGreen 则因为不能穿透细胞膜而完全没有进入细胞内, 足以证明GelRed和GelGreen是安全的。
图 3. GelGreen （绿色） GelRed （红色）在 PBS 缓冲溶液中结合 dsDNA 后的激发和发射光谱。
图 4. 室温下， GelRed （ 500 nm ）和 SYBR Gold （ 488 nm ）稀释在 1 × TBE 凝胶染色液中测得的吸光度随时间变化图。 GelRed 和 SYBR Gold 初始的吸光度值分别为 0.029 和 0.051 。
GelRed 和GelGreen特点：
比EtBr安全：
艾姆斯氏实验以及其他实验证实无诱变性无细胞毒性；
方便处理：
通过了环境安全实验，可以直接丢弃无需特殊处理。
超高的灵敏度：
比EtBr和SYBR Safe更灵敏。
极高的稳定性：
溶于水中，室温下能长期保存，微波炉加热性能稳定。
广泛的适用性：
适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色。
简单的步骤：
预制凝胶和凝胶电泳后染色。
兼容标准紫外凝胶成像系统及可见光激发的凝胶观察装置：
使用312nm激发的UV凝胶成像系统时，GelRed可以替代EB;无需改变成像条件；GelRed 可用EB常用仪器观察；GelGreen可用SYBR染料仪器进行观察。GelRed 可以替代 EB ； GelGreen 足以替代任意一种 SYBR 染料。
可用于下游实验：
普通的胶回收后，可用于下游实验。
产品信息：
| Cat# | Product Name | Unit Size | 品 牌 |
| 41001 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 3X in water | 4.0 L | Biotium |
| 41002 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO | 0.5 mL | Biotium |
| 41003 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water | 0.5 mL | Biotium |
| 41003-1 | GelRedTM 10,000X solution in water, bulk pack | 10 mL | Biotium |
| 41004 | GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO | 0.5 mL | Biotium |
| 41005 | GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water | 0.5mL | Biotium |
原创作者：上海创凌生物科技有限公司
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